CWA 18386:2026

Dit document beschrijft een gestandaardiseerd analytisch protocol voor de kwantificering van de inkapselingsefficiëntie van RNA en DNA in lipide nanodeeltjes (LNP' s) met behulp van een fluorometrische methode. De methode is gebaseerd op het gebruik van fluorescentiekleurstoffen die selectief reageren met vrije nucleïnezuren, waardoor een duidelijk onderscheid mogelijk is tussen ingekapselde en niet-ingekapselde soorten. Om het totale nucleïnezuurgehalte te bepalen, worden de LNP' s gelyseerd met een detergentbehandeling, waardoor het ingekapselde materiaal volledig vrijkomt voor een nauwkeurige meting.

Het hier beschreven protocol is ontworpen om een snelle, gevoelige en reproduceerbare methode te bieden voor de niet-destructieve kwantificering van de inkapselingsefficiëntie van nucleïnezuren. Het ondervangt de beperkingen van traditionele technieken zoals gelelektroforese en UV-spectroscopie, die mogelijk een gebrek aan gevoeligheid en specificiteit vertonen.

Dit document is van toepassing op de karakterisering van LNP-formuleringen die worden gebruikt voor de afgifte van nucleïnezuren, met name in onderzoeks- en vroege ontwikkelingsfasen. Dit document is bedoeld voor gebruik door academische laboratoria, biotechnologiebedrijven en farmaceutische ontwikkelaars die werken aan op LNP gebaseerde systemen voor therapeutische toepassingen.

De reikwijdte van dit document is beperkt tot de analytische bepaling van de inkapselingsefficiëntie door middel van fluorometrie. Het behandelt geen aspecten met betrekking tot LNP-formulering, fysisch-chemische karakterisering, in vivo prestaties of therapeutische werkzaamheid.